细胞反应器现状图谱分析,细胞反应器实验报告
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1、动物细胞反应器应具有哪些基本要求?有哪些类型?特点是什么?
悬浮细胞的增大反应器体积,贴壁细胞增大介质总表面积,如大规模转瓶、微载体、固定床等,都要逐级放大。
气升式生物反应器气升式生物反应器(airliftbioreactor)也是实现动物细胞高密度培养的常用设备之一,其特点是结构简单,操作方便。有人在气升式反应器中利用微载体培养技术,研究了Vero细胞高密度培养的工艺条件。
动物反应器:比如小鼠乳腺细胞表达系统等,具有真核动物细胞的蛋白加工系统,适合表达微生物反应器和植物反应器不能很好表达的动物内源性基因。植物反应器:拟南芥,烟草等,适合表达一些真核基因和某些原核基因。
细胞培养的条件和要求 所有与细胞接触的设备、器材和溶液等,都必须保持绝对无菌,避免细胞外微生物的污染。目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。如:玻璃制品、布类、金属制品:8kg20min。
2、动物细胞培养反应器的分类及结构特点
动植物反应器:优点在于能表达较为复杂的蛋白,缺点就是操作复杂,周期长,转化效率低。微生物反应器:大肠杆菌,毕赤酵母等,适合表达原核蛋白和一些真核蛋白。优点就是生长快,周期短,操作简单,转化效率高。
英国Celltech公司用气升式生物反应器生α、β和γ干扰素;用无血清培养液在10000L气升式生物反应器中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体。
生物反应器,是指利用酶或生物体(如微生物、动植物细胞等)所具有的特殊功能,在体外进行生物化学反应的装置系统。生物反应器与化学反应器不同。化学反应器从原料进入到产物生成,常常需要加压和加热,是一个高能耗过程。
悬浮细胞的增大反应器体积,贴壁细胞增大介质总表面积,如大规模转瓶、微载体、固定床等,都要逐级放大。
3、动物细胞培养反应器的发展趋势
由于这些国内公司缺乏生物过程技术的研究力量以及工艺、工程、装备一体化的研究体系,因而不能随着生物技术发展有同步生物反应器的开发能力,例如对于大规模动物细胞生物反应器,至今国内还没有符合要求的定型产品推出。
其技术特点在于不仅能促进细胞生长、防止细胞损伤,而且还能支持细胞在大规模生物反应器中实现高密度培养,并有利于泡沫控制。
发酵工程展望及应用前景 随着生物技术的发展,发酵工程的应用领域也在不断扩大。
相比之下,非搅拌式反应器产生的剪切力较小,在动物细胞培养中表现出了较强的优势。(1)填充床反应器填充是在反应器中填充一定材质的填充物,供细胞贴壁生长。营养液通过循环灌流的方式提供,并可在循环过程中不断补充。
动物细胞与微生物细胞有很大的差异,对体外培养有严格的要求,如动物细胞对剪切非常敏感,反应器的选择不能有像微生物细胞那样高的剪切力,因此,传统的微生物细胞生物反应器应该经过改造才能适用动物生物反应器。
4、动物细胞培养反应器的现状
搅拌式生物反应器用于动物细胞培养存在的最大缺点是剪切力大,容易损伤细胞,虽然经过各种改进,这个问题仍很难避免。相比之下,非搅拌式反应器产生的剪切力较小,在动物细胞培养中表现出了较强的优势。
生产过程产率和生物反应器生产能力则可同时提高数十倍,从而显著提高细胞培养过程的经济性,彻底改变传统灌注培养方式只提高产量不提高经济性的缺陷。
八十年代以来,人们逐渐开始以生物反应器培养代替鼠腹水的方法获得单克隆抗体。现在,由于动物细胞培养技术在规模和可靠性方面都不断发展,且从中得到的蛋白质也被证明是安全有效的,因此人们对动物细胞培养的态度已经发生了改变。
实验中染菌物品和动物尸体等:8 kg20min。试管、吸管等,则可采用干热灭菌;一切不适于加热灭菌的液体,如人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液,可采用过滤法除菌。
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