昆虫细胞sf9在四种生物反应器中的培养，sf9昆虫细胞系
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1、求sf9细胞的具体培养方法
antheraea 培养液，每升培养液加3g酵母粉和3g乳白蛋白水解物，用1m koh调ph到2-4过滤除菌，4℃保存。完整培养液在使用前加入10%热灭活的胎牛血清。
在悬浮培养液中培养Sf9细胞，并使之适应无血清培养液。 准备旋转培养瓶，用于按比例扩增Sf9细胞，将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂，另用一平盖接在另一侧臂。
细胞接种：将培养基加入含有细胞的培养皿中，使细胞悬浮在培养基中。可以使用细胞传代或原代培养方法，根据需要调整初始细胞密度。培养条件控制：确定适当的培养条件，包括温度、湿度、CO2浓度和氧气浓度。
细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗，弃上清液。
2、杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务案例—钟鼎生物
常用的杆状病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（AcNPV）和家蚕型多角体病毒（BmNPV），常用的宿主细胞则来源于草地夜蛾Sf9细胞，用于表达外源基因的质粒来源于PUC系列，其含有一个多克隆位点和多角体蛋白启动子。
用杆状病毒做载体，可高效表达外源基因，到目前为止已有几百个包括动植物、病毒、细菌、真菌的基因在昆虫细胞或幼虫体内得到高效表达。
杆状病毒的基因组为单一闭合环状双链DNA分子，大小为80～160 kb，其基因组可在昆虫细胞核内复制和转录。
DNA共转染昆虫细胞，通过多角体蛋白基因启动子两端的侧翼同源序列与AcNPV DNA在胞内发生同源重组，使多角体基因被外源基因取代，而将外源基因整合到病毒基因组的相应位置，这样就获得了重组的杆状病毒。
为昆虫杆状病毒表达系统之一。家蚕杆状病毒表达系统具有以下优点：（1）能够对重组蛋白进行转录后加工与修饰，使它们在结构及功能上更接近于天然蛋白，与原核系统相比更能保证蛋白的生物学活性。
3、昆虫细胞sf9培养温度31度正常吗
Sf9细胞生长条件：27℃、无需CO既可悬浮生长也可贴壁生长、培养基SF-900Ⅱ（无血清）。悬浮培养时把细胞在悬浮培养瓶中，要有滚动装置（若无上述装置可把培养瓶放在小摇床上200rpm摇振陪养）。
高温对细胞培养不利。细胞在39～40℃培养1小时，能受到一定损伤，但仍有可能恢复，但不能忍受温度再升高2℃，持续数小时，即在41～42℃中培养1小时，细胞损伤严重，温度至43℃以上时细胞多数被杀死。
合适的温度 一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。
细胞培养一般的都是37℃，温度太高会使细胞逐渐凋亡。 酶一般最适温度是37℃，所以一般在37℃下培养。温度太高，时间过长会导致酶失活。
不需要普通细胞那么高级的培养箱，不需要CO2，温度为27度。 养细菌的培养箱就可以养昆虫细胞。当然，细胞培养箱也可以用。 昆虫细胞液会贴壁，不过贴得不牢。 要无菌操作，要超净工作台。
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