细胞在反应器里不长,细胞生物反应器的结构与操作
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- 细胞贴壁后不长怎么回事?大前天复苏的细胞,前天看的时候贴壁的还蛮多...
- 从ATCC采购一株Vero细胞,在复苏时出现细胞不贴壁、不生长现象,请问有哪 ...
- 请细胞培养高手回答我的细胞长不上去怎么办
- 细胞太稀了为什么长不起来
1、细胞贴壁后不长怎么回事?大前天复苏的细胞,前天看的时候贴壁的还蛮多...
培养皿不合适、培养基不合适(比如没有血清,或者血清错误)等,都可能出现这种情况。
首先确定你的培养条件没有问题,培养基里改加的都加了,培养基和血清都是合格的牌子和批次。然后确定你拿来复苏的细胞没有问题。再看看你的培养条件,二氧化碳还有吗,培养箱的水槽还有水吗,培养箱温度控制对不对,等等。
细胞贴壁生长是因为一些特殊的促细胞附着的物质(如层粘连蛋白、纤维链接蛋白、III型胶原、血清扩展因子等)可能参加细胞的贴附过程。
齐氏生物认为复苏细胞是否贴壁跟你冻存时的操作有直接关系。而且细胞的传代数越多,即细胞越老,越禁不起低温的折腾。复苏后,细胞有个休眠期,大约7-14天不等。只要不死,你就慢慢养着。
2、从ATCC采购一株Vero细胞,在复苏时出现细胞不贴壁、不生长现象,请问有哪 ...
你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,但我因为这个问题就两种肺癌细胞和一种肝癌细胞专门做过试验,这个绝对是绝大部分人细胞复不活的一个原因。
Vero细胞遗传性状稳定,恶性化概率小,无外源性污染,具有良好的生物安全特性;Vero细胞对多种病毒敏感,生产的病毒滴度高;Vero细胞对培养条件要求不高,在微载体表面能良好的贴附生长,易在生物反应器放大培养。
大多数疫苗都需要加人血白蛋白。人血白蛋白的制造来源于健康人的血,并且工艺当中有病毒灭活的工艺,而且在成品检测当中还有相应的检测,不合格是不允许出厂的,你说的情况是不可能出现的。你不用担心。
而且它很容易消化,第一次养的话注意一点不要消化过头,传代的时候多吹打,因为它消化下来的时候成团,不像别的系,细胞都分散。293的ATCC培养基从来没说过用马血清,不要被误导了。图片是atcc培养基的截图。
细胞养不好,可能的原因有,THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是一个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。
3、请细胞培养高手回答我的细胞长不上去怎么办
建议你重新复苏,不知道你复苏时一个细胞瓶加几只冻存管细胞,如果细胞状态不好,或者每只冻存管里的细胞数量少,我一般一个25的细胞瓶里加2-3只冻存管的细胞。
正确的做法 是把装培养基的瓶口拧松,放到二氧化碳培养箱中,过夜。让培养箱中的二氧化碳进入培养基。pH值就可以纠正回来。如果不想这么做,也可以在培养基中加Hepes。
建议你最好把培养基先在培养箱里 边孵育15min先。另外,跟你细胞的生长状态也有关。加药之前的细胞可以用高点的血清浓度培养。保证细胞状态良好。
不加胰岛素这个细胞也比较容易长。不知道你用什么容器养,如果状态不好建议你用24孔板养它,这样就容易成活一些,等成活了再转瓶子养。 另外,细胞没长好之前不要换太多液, 传代后第三四天的时候换液比较好。
4、细胞太稀了为什么长不起来
原因是沉淀不足。使用密度梯度稀释法时,如果稀释过度,会导致离心后样品中的细胞或颗粒沉淀不足,甚至无法分离出目标物质,这可能是太稀不长的原因之一。
接种密度太低会导致细胞长不起来,稀疏时,细胞两级朝向不规律,细胞就会逐渐伸长出现拉丝。消化过度导致了部分细胞的细胞膜受损、凋亡,部分细胞膜受到破坏,导致细胞生长缓慢,出现拉丝。
细胞密度过低会导致生长缓慢,增加细胞接种密度,将细胞从大皿转移到小皿中培养,或适当增加培养基中的血清浓度。
你好。你的孩子白细胞低,和病毒感染以及用抗病毒药有关。按说停药以后,再用了升白药物,白细胞会逐渐恢复至正常。而你的孩子是停药,白细胞又将至较低的状态。
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